kumpulan materi seputar farmasi: KLT part 1

BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Fitokimia adalah sebuah ilmu yang mempelajari tentang berbagai senyawa organik yang terdapat tumbuhan, yaitu tentang metabolit – metabolit, struktur kimia, biosintetis, perubahan dan metabolisme, serta penyebaran secara alami dan fungsi dari senyawa organik tersebut.

Dalam ruang lingkup farmakognosi – fitokimia proses untuk mendapatkan suatu hasil berupa ekstrak perlu dilakukan yang namanya ekstraksi. Senyawa yang terdapat pada sampel berupa metabolit – metabolit sekunder. Metabolit sekunder tersebut berupa alkaloid, flavonoid, tanin, steroid, saponin, minyak atsiri dan lain sebagainya.

Beberapa metode kromatografi diantaranya adalah kromatografi kertas dan kromatografi lapis tipis atau yang biasa disebut KLT. Kromatografi kertas sebagai penyerap digunakan sehelai kertas dengan susunan serabut pada lapisan selulosa yang lazim, menyebabkan lebih banyak terjadi difusi ke samping dan bercak lebih besar.

Pada praktikum ini kita akan lakukan identifikasi golongan komponen kimia dengan metode kromatografi lapis tipis (KLT) dari ekstrak n – Heksan dan n – butanol sampel daun mali-mali (Leea indica (Burm. f.) Merr.

B. Maksud Percobaan

Mengetahui dan memahami cara identifikasi komponen ekstrak n – Heksan dan n – butanol sampel daun mali-mali (Leea indica (Burm. f.) Merr) secara kromatografi lapis tipis.

C. Tujuan Percobaan

Identifikasi komponen kimia ekstrak n – Heksan dan n – butanol sampel daun mali-mali (Leea indica (Burm. f.) Merr. secara kualitatif dengan metode kromatografi lapis tipis dengan melihat warna noda dan nilai Rf nya.

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

A. Uraian Tanaman

1. Klasifikasi Mali-mali (Warintek, 2011)

Divisio : Spermatophyta

Subdivisio : Angiospermae

Clasis : Dicotyledoneae

Ordo : Rhamnales

Familia : Leeaceae

Genus : Leea

Spesies : Leea indica (Burm. f.) Merr

2. Nama Lain

Girang memiliki nama lain seperti; ginggiyang (sunda), girang (jawa tengah), Jirang (Madura), Kayu ajer perempuan (Melayu), Mali-mali (Makassar), Uka (Maluku) (Depkes RI, 2001).

3. Morfologi Tanaman

Tumbuhan Girang merupakan tumbuhan perdu, tahunan, tingginya 1

- 3 m. Batang tumbuhan ini berkayu, bercabang, bentuk bulat, masih muda berambut, dan hijau. Daun tumbuhan majemuk, anak daun lanset, bertangkai pendek, tepi daun bergerigi, ujung daun runcing, pangkal membulat, panjangnya 6-25 cm, lebarnya 3-8 cm, berambut dan berwarna hijau. Bunga tumbuhan majemuk bentuk malai, kelopak bulat telur, panjang 2-5 cm, kuning keputih-putihan. Buahnya berbentuk bulat diameter ± 12 mm, masih muda hijau dan setelah tua ungu kehitaman dengan biji kecil bentuk sagitiga dan berwarna putih kekungingan. Tumbuhan ini termasuk tumbuhan berakar tunggal dengan warna cokelat muda (Depkes RI, 2001).

4. Kandungan Kimia

a. Flavonoid

Kandungan kimia tumbuhan Daun, buah dan akar mali-mali mengandung flavonoida (Warintek, 2011).

Flavonoid merupakan kandungan khas tumbuhan hijau dan sebenarnya terdapat pada semua bagian tumbuhan termasuk daun, akar, kayu, kulit, tepung sari, nectar, bunga, buah buni, dan biji (Markham, 2005).

Kerangka dasar flavonoid dan system penomoran untuk turunan flavonoid. Flavonoid sangat dimungkinkan dalam sejumlah pengobatan tradisional yang substansinya belum diketahui akan tetapi menunjukkan isi zat aktifnya flavonoid. Flavonoid berkhasiat sebagai antiinflamasi anti alergi, antithrombolik, vasoprotektif sebagai penghambat promoter tumor dan untuk proteksi pada mukosa saluran cerna atau gastric. Efek-efek tersebut berhubungan dengan pengaruh flavonoid pada metabolisme asam arakhidonat (Evans, 2002).

b. Tanin

Tanin merupakan substrat kompleks yang biasanya terjadi sebagai campuran polifenol yang sulit diseparasi karena tidak dapat dikristalkan. Tanin dapat tersebar luas dalam tumbuhan berpembuluh dalam angiospermae khusunya dalam jaringan kayu. Dalam dunia kesehatan tannin digunakan sebagai astringen yang mengakibatkan pengurangan bengkak (edema), radang dan sekresi pada gastrointestinal dan pada abrasi kulit (Dalimartha, 2001).

c. Steroid/ triterpenoid

Steroid merupakan lemak yang dikarakteristikan mempunyai kerangka karbon yang dihubungkan dengan empat cincin (Anonim, 2006).

Sebagian besar senyawa steroid dan terpenoid adalah senyawa non polar, karena itu dapat dipisahkan dari komponen tumbuhan yang polar dengan mengestraksi menggunakan pelarut seperti benzene atau eter (Dalimartha, 2001).

d. Saponin

Disamping itu daun dan akarnya mengandung saponin, daunnya mengandung polifenol, buah serta akarnya juga mengandung tannin (Warintek, 2011).

Saponin adalah glikosida triterpena dan sterol dan telah terdeteksi dalam lebih dari 90 suku tumbuhan. Saponin merupakan senyawa aktif permukaan dan bersifat seperti sabun, serta dapat dideteksi berdasarkan kemampuannya membentuk busa dan menghemolisis sel darah (Dalimartha, 2001).

e. Manfaat Tanaman

Daun Leea indica berkhasiat sebagai obat kepala pusing (Warintek, 2011).

Daun Leea indica berkhasiat sebagai obat kepala pusing. Untuk obat kepala pusing dipakai ± 7 gram daun segar Leea indica, dicuci ditumbuk sampai lumat, kemudian ditempelkan pada pelipis kanan dan kiri (Rahman, et al, 2012).

B. Uraian Praktikum

Kromatografi adalah suatu metoda untuk separasi yang menyangkut komponen suatu contoh di mana komponen dibagi-bagikan antara dua tahap, salah satu yang mana adalah keperluan selagi gerak yang lain. Di dalam gas chromatography adalah gas mengangsur suatu cairan atau tahap keperluan padat. Di dalam cairan chromatography adalah campuran cairan pindah gerakkan melalui cairan yang lain , suatu padat, atau suatu 'gel' agar. Mekanisme separasi komponen mungkin adalah adsorpsi, daya larut diferensial, ion-exchange, penyebaran/perembesan, atau mekanisme lain (David. 2001).

Adsorpsi Chromatography telah membantu untuk menandai komposisi kelompok minyak mentah dan produk hidrokarbon sejak permulaan abad ini. Jenis dan sanak keluarga jumlah kelas hidrokarbon tertentu di (dalam) acuan/matriks dapat telah a efek dalam pada atas pencapaian dan mutu dari produk hidrokarbon dan dua orang metoda test standard telah digunakan sebagian besar dari tahun ke tahun (ASTM D2007, ASTM D4124). (Speight, 2006)

Pada hakekatnya KLT merupakan metode kromatografi cair yang melibatkan dua fase yaitu fase diam dan fase gerak. Fase geraknya berupa campuran pelarut pengembang dan fasa diamnya dapat berupa serbuk halus yang berfungsi sebagai permukaan penyerap (kromatografi cair-padat) atau berfungsi sebagai penyangga untuk lapisan zat cair (kromatografi cair-cair). Fase diam pada KLT sering disebut penyerap walaupun berfungsi sebagai penyangga untuk zat cair di dalam sistem kromatografi cair-cair. Hampir segala macam serbuk dapat dipakai sebagai penyerap pada KLT, contohnya silika gel (asam silikat), alumina (aluminium oksida), kiselgur (tanah diatomae) dan selulosa. Silika gel merupakan penyerap paling banyak dipakai dalam KLT (Iskandar, 2007).

Pemisahan komponen kimia berdasarkan pada proses terjadinya eksitasi dari tingkat energi yang rendah ke tingkat energi yang lebih tinggi akibat adanya penyerapan radiasi dalam daerah UV-Visibel oleh suatu molekul yang memiliki ikatan rangkap yang terkonjugasi atau gugus kromofor yang terikat dengan gugus auksokrom (Mufidah, 2001).

BAB III

METODE PRAKTIKUM

A. Alat dan Bahan

1. Alat

Adapun alat yang digunakan dalam praktikum adalah batang pengaduk, vial, cawan porselin, sendok tanduk, gelas ukur, vinset, alat UV.

2. Bahan

Adapun bahan yang digunakan dalam praktikum adalah ekstrak n – Heksan dan n – butanol sampel daun mali-mali (Leea indica (Burm. f.) Merr, methanol, eluen (n – Heksan dan etil asetat), alumunium foil, lempeng silica dan tissue.

B. Prosedur Kerja (Anonim, 2016)

a. penyiapan Lempeng KLT dan Penjenuhan Chamber

1. Penyiapan Lempeng Silika gel

· Lempeng silica gel F₂₅₄yang berukuran 20 x 20 cm. dipotong dengan ukuran 8 cm x 1 cm (untuk satu ekstrak).

· Lempeng diberi garis penotolan menggunakan pensil 3b pada bagian bawah dengan 1 cm dan garis bagian atas 0,5 cm dari bagian atas.

2. Penjenuhan chamber

· Disiapkan dua buah chamber yang bersih lengkap dengan penutupnya.

· Chamber (1) dan chamber (2) diisi dengan eluen dengan kepolaran yang berbeda.

· Kemudian dimasukkan potongan kertas saring yang panjangnya lebih dari tinggi chamber dan kemudian di tutup.

· Eluen dibiarkan hingga naik melalui kertas saring hingga melewati penutup kaca (chamber dianggap telah jenuh).

b. Penotolan Sampel pada Lempeng

1. Disiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan.

2. Ekstrak n – Heksan (dilaturkan dengan methanol), ekstrak n – butanol (dilarutkan dengan methanol).

3. Ektrak diambil dengan menggunakan pipa kapiler, kemudian ditotolkan hati – hati pada lempeng yang telah disiapkan (jika memungkinkan untuk tujuan kuantitatif gunakan mikropipet sebanyak 5 – 20 mikroliter).

4. Lempeng yang telah ditotol diangin – anginkan sebentar untuk menguapkan pelarutnya lalu dimasukkan ke dalam chamber yang telah dijenuhkan.

5. Bila eluen telah mencapai batas atas dari lempeng silica gel, maka lempeng tersebut dapat dikeluarkan.

6. Amati secara langsung dan dengan menggunakan penampak bercak UV₂₅₄dan UV₃₆₆.

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil Pengamatan

1. Sampel 1 (ekstrak n – Heksan)

Nama simplisia : Daun mali-mali (Leea indica (Burm. f.)

Uji pendahuluan mengandung: Alkaloid dan steroid

Fase diam : Lempeng silica

Fase gerak : Eluen

Ukuran lempeng : 7 cm x 1 cm

Table perhitungan nilai Rf warna dan komponen kimia teridentifikasi pada penampak bercak yaitu :

No	Bercak	Bercak noda	UV	₂₅₄	UV	₃₆₆
	noda		Rf	Warna	Rf	Warna
1	n - Heksan	Ada	0,81	Hijau	0,6 0,8 0,85	Kecoklatan

2. Sampel 2 (ekstrak n – butanol)

Nama simplisia : Daun mali-mali (Leea indica (Burm. F.)

Uji pendahuluan mengandung: Alkaloid dan steroid

Fase diam : Lempeng silica

Fase gerak : Eluen

Ukuran lempeng : 7 cm x 1 cm

Table perhitungan nilai Rf warna dan komponen kimia teridentifikasi pada penampak bercak yaitu :

No	Ekstrak	Bercak noda	UV	₂₅₄	UV	₃₆₆
			Rf	Warna	Rf	Warna
1	n – butanol	Ada	1,09	Hijau	0,72 0,90 1,09	Kecoklatan

B. Pembahasan

Pada identifikasi golongan komponen kimia dengan metode kromatografi lapis tipis dilalukan dengan menggunakan ekstrak n – Heksan dan n – butanol sampel daun mali-mali (Leea indica (Burm. f.) Merr.

Pertama dilakukan adalah disiapkan lempeng silica yang telah dipotong dengan ukuran 7 cm x 1 cm. Kemudian disiapkan 2 buah chamber yang akan diisi dengan eluen dimana eluen yang akan dibuat dengan perbandingan 7:3 yang 7 adalah n – Heksan dan 3 adalah etil asetat. Setelah chamber diisi dengan eluen lalu dimasukkan kertas saring sampai cairan eluen naik dan melewati tutup chamber maka eluen sudah dapat dikatakan jenuh.

Larutkan ekstrak sampel dengan menggunakan methanol, lalu totol pada lempeng silica setelah itu masukkan kedalam chamber yang berisi eluen dan diamkan sampai eluen mencapai batas tanda. Setelah mencapai batas angkat lempeng dan letakkan pada UV₂₅₄dan UV₃₆₆. Amati bercak noda yang terlihat pada lampu UV tersebut.

Setelah diamati dibawah lampu UV dan dihitung nilai Rf nya didapatkan hasil yaitu pada ektrak n – Heksan terdapat bercak noda dimana pada UV₂₅₄warna dari bercaknya hijau dengan nilai Rf yaitu 0,81 dan pada UV₃₆₆warna dari bercaknya kecoklatan dengan nilai Rf yaitu 0,6, 0,8 dan 0,85 dengan tiga bercak noda.

Dan pada ektrak n – butanol terdapat bercak noda dimana pada UV₂₅₄warna dari bercaknya hijau dengan nilai Rf yaitu 1,09 dan pada UV₃₆₆warna dari bercaknya kecoklatan dengan nilai Rf yaitu 0,72, 0,90 dan 1,09 juga dengan tiga bercak noda.

BAB V

PENUTUP

A. Kesimpulan

Setelah dilakukan percobaan dapat disimpulkan bahwa :

1. Ektrak n – Heksan pada UV₂₅₄warna bercaknya hijau dengan nilai Rf 0,81 dan pada UV₃₆₆warna bercaknya kecoklatan dengan nilai Rf yaitu 0,6, 0,8 dan 0,85 dengan tiga bercak noda.

2. Ektrak n – Heksan pada UV₂₅₄warna bercaknya hijau dengan nilai Rf 1,09 dan pada UV₃₆₆warna bercaknya kecoklatan dengan nilai Rf yaitu 0,72, 0,90 dan 1,09 juga dengan tiga bercak noda.

B. Saran

Sebaiknya praktikan dapat lebih hati – hati ketika melakukan praktikum agar dapat meminimalisir kesalahan dan tidak terjadinya kerusakan pada alat.

DAFTAR PUSTAKA

Anonim, 2016. Penuntun dan Buku Kerja Praktikum Fitokimia I. Makassar, Universitas Muslim Indonesia.

Dalimartha, S, 2001, Atlas Tanaman Obat Indonesia, Jilid I, 130-132, Trubus Agriwidya, Jakarta.identfikasi Flavonoid 1-34, Penerbit ITB, Bandung.

David, C. 2001. Gas Cromatography. Kogan Page. London.

Depkes RI, 2001, Pelayanan Informasi Obat, Departemen Kesehatan RI, Jakarta.

Evan. 2013. Isolasi, Identifikasi dan Uji Aktifitas Senyawa Alkaloid Daun Binahong (Anredera cordifolia (Tenore) Steenis).

Iskandar, M.J. 2007. Pengantar Kromatografi Edisi Kedua. Penerbit ITB. Bandung.

Markham, K.R., 2005, Techniques of Flavonoid Identification, diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata.

Muhfida, M.W. 2001. “Panduan Praktikum Analisis Fitokimia”. Laboratorium Farmakologi Jurusan Farmasi FMIPA. Universitas Padjadjaran. Bandung.

Rahman, R. A., H. J. Edy, A. Yudistira. 2012. Isolasi Dan Identifikasi Flavonoid Dalam Daun Lamun (Syringodium Isoetifolium).